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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:G蛋白偶聯(lián)受體73A抗體 ELF5蛋白抗體 NECAP1蛋白抗體 大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞 小鼠垂體瘤細(xì)胞;GT1-7 CX-1(人結(jié)腸癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:537

更新時間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

鞏膜組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7744

細(xì)胞簡介:

大鼠鞏膜成纖維分離自鞏膜組織,鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯(lián)接角膜,后方與視神經(jīng)的鞘膜延續(xù)。鞏膜在視神經(jīng)穿出部附近最厚,愈前愈薄,在肌腱附著處又復(fù)增厚。其與角膜交界處,外面有環(huán)形的角膜溝,深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍(lán)色,成年為白色,老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結(jié)構(gòu)堅(jiān)韌,有支持和保護(hù)眼內(nèi)組織的作用。成纖維細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鞏膜成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鞏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 貼壁不包被

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

植物血凝素(PHAELISAKit   ELISA. 

植物生長激素(GHELISAKit   ELISA. 

植物凝脂酸(PAELISAKit   ELISA. 

植物吲哚乙酸(IAAELISAKit   ELISA.

Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒

Human single sanded DNA aibody / denatured DNA aibody (ssDNA) ELISA Kit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)試劑盒

PorcineIerferonγ,IFN-γELISAKit 豬γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAg-NORs(HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins)ELISAKit人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白

血液乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20

MouseansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒

1號染色體開放閱讀框50抗體

蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶抗體

CNTF重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

己糖激酶1(HK1)重組蛋白 Recombinant Hexokinase 1 (HK1)

ECD重組人 ECD / Ecdysoneless homolog 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白

IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

己糖激酶1(HK1)重組蛋白 Recombinant Hexokinase 1 (HK1)

AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白

CNTF重組小鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ECD重組人 ECD / Ecdysoneless homolog 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠鞏膜成纖維細(xì)胞小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA 試劑盒

Rat ai IVIgG aibody ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗體試劑盒

HumanGlycatedAlbumin,GAELISAKit 人糖化白蛋白(GA)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)試劑盒

植物半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20

Mouse15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。


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