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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
人小氣道上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人小氣道上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：KIAA1731蛋白抗體 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12重組兔單克隆抗體 干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體 人牙髓干細(xì)胞 人小腸平滑肌細(xì)胞 SHI-1人急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 HKC (人腎小管上皮細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量：597
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人小氣道上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
小氣道組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7045 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人小氣道上皮分離自小氣道；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱(chēng)為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時(shí)，空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無(wú)軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子，并可能通過(guò)HLA-DR表達(dá)呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞；小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點(diǎn)：①小氣道阻力小；②氣流速度慢；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人小氣道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人小氣道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠催乳素(mouse PRL) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠孕(mouse PROG) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠抗復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒
HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GL1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG試劑盒人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞總RNA分離試劑盒20次
MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒規(guī)格：96T/48T
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框40抗體
蛋白酪磷酸酶非受體型22抗體
FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)
TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白
IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)
CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白
CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein
KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein
人小氣道上皮細(xì)胞大鼠三葉因子2(TFF2)試劑盒 ，英文名： TFF2 ELISA Kit
Mouse signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)試劑盒
Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 大鼠酶(CA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHAase(HumanHyaluronidase)ELISAKit人透明質(zhì)酸酶
細(xì)胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量試劑盒20次
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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