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2024-07-03

2型神經(jīng)纖維瘤抗體的標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì)0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;2.所用的NHSB及待化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選最適條件;3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時(shí)可加入去污劑如Tritonx-10...

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2024-06-27

大鼠牙乳細(xì)胞提取物培養(yǎng)步驟:一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(UnitedStates,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。二.細(xì)胞處理:1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基...

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2024-06-21

磷酸鹽緩沖液是一種常用的生物化學(xué)試劑,主要由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成,用于維持溶液在一定pH范圍內(nèi)穩(wěn)定。主要由磷酸二氫鈉(NaH?PO?)和磷酸氫二鈉(Na?HPO?)組成,這兩種物質(zhì)在溶液中能夠形成緩沖體系,調(diào)節(jié)溶液的酸堿度。此外,根據(jù)具體需求,PBS中還可能包含其他成分,如氯化鈉(NaCl)和氯h鉀(KCl),以模擬人體內(nèi)的離子環(huán)境。磷酸鹽緩沖液的pH值通常維持在7.4左右,這是因?yàn)檫@個(gè)pH值與人體血液的pH值相近,適用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)等應(yīng)用。不同pH值的PBS...

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2024-06-21

磷酸鹽緩沖液是一種常用的生物化學(xué)試劑,主要由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成,用于維持溶液在一定pH范圍內(nèi)穩(wěn)定。主要由磷酸二氫鈉(NaH?PO?)和磷酸氫二鈉(Na?HPO?)組成,這兩種物質(zhì)在溶液中能夠形成緩沖體系,調(diào)節(jié)溶液的酸堿度。此外,根據(jù)具體需求,PBS中還可能包含其他成分,如氯化鈉(NaCl)和氯h鉀(KCl),以模擬人體內(nèi)的離子環(huán)境。磷酸鹽緩沖液的pH值通常維持在7.4左右,這是因?yàn)檫@個(gè)pH值與人體血液的pH值相近,適用于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)等應(yīng)用。不同pH值的PBS...

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2024-06-18

大鼠層連蛋白/板層素(LN)檢測(cè)ELISA試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加...

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2024-06-13

人再生胰島衍生胰石蛋白/胰線(xiàn)蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀...

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2024-06-06

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族)的實(shí)驗(yàn)步驟:一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順...

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